В прошлом столетии Отто Варбург обнаружил, что основным источником АТФ в опухолевых клетках является гликолиз. Согласно гипотезе Варбурга причиной активации гликолиза было необратимое повреждение дыхательной функции митохондрий, которое, в свою очередь, может приводить к опухолевой трансформации клетки. Однако гипотеза Варбурга постепенно теряла свою актуальность из-за отсутствия убедительных доказательств наличия м итохондриа льных дефе ктов в опу холевых клет ках. Ученые ст али полагат ь, что изме нения в биоэ нергетике о пухолевых к леток, скорее, я вляются сле дствием, не жели причи ной опухоле вой трансфор мации клето к. Внедрен ие в клиничес кую практи ку в девяност ых годах про шлого столет ия позитро нно-эмиссио нной томогр афии с фтор дезоксиглю козой для в изуализаци и опухолей возро дило интерес н аучного сооб щества к г ипотезе Варбур га. Однако до с их пор вопрос о то м, какую ро ль играет этот эффе кт в канцеро генезе, ост ается пока не ясным. В н астоящем обзоре м ы попыталис ь рассмотрет ь научные ар гументы, по ддерживающ ие или опро вергающие г ипотезу Варбур га.
Можно выделить шесть основных свойств, характеризующих рак
- Способност ь злокачест венных клето к стойко со храняться и нео граниченно р асти.
- Потеря р аковыми клет ками специф ических фу нкций, хар актерных д ля клеток нор мальных тк аней – их пре дшественни ков.
- Прораст ание опухо ли в окруж ающие ткан и и их разру шение.
- Способност ь злокачест венных клето к к распростр анению из пер вичного оч ага с токо м крови ил и лимфы по ор ганизму и осе дание в раз личных тка нях с форм ированием втор ичных узло в (метастазо в) такого же т ипа, что и пер вичная опу холь. При это м, если ус ловия в ор ганизме ст ановятся неб лагоприятн ыми для опу холевых клето к, процесс и х размноже ния способе н приостано виться, и то гда они мо гут в тече ние ряда лет преб ывать в та к называемо м спящем состо янии. С насту плением бл агоприятны х для них пере мен опухоле вые клетки в новь начин ают усилен но расти. Д авать метаст азы способ ны все фор мы рака, о днако частот а и время и х зависят от т ипа злокачест венной опу холи.
- Общая с амоинтокси кация и ка хексия (кр айняя степе нь истощен ия) на поз дних стади яхразвития бо лезни.
- Способност ь к рециди вированию. Т ак, после х ирургическо го удалени я опухоли и ли исчезно вения ее по д влиянием луче вого лечен ия иногда, через тот и ли иной про межуток вре мени, возн икает нова я опухоль то й же структур ы, что и ис ходная. Св язано это с не достаточност ью разруша ющих возде йствий на з локачестве нные клетк и, ослабле нием защит ных сил ор ганизма.[1]
Митоходриальная Д НК и канцеро генез
Митохондрии м лекопитающ их содер- ж ат геном д линой в 16,5 т ысяч нуклеот идов, включ ающий 37 ге нов, из котор ых 13 явля ются компо нентами ды хательных фер ментов. Отсут- ст вие гистоно в и близост ь митохондр иального ге нома к источ никам образо вания акти вных форм к ислорода де лает митохо ндриальную Д НК высокочу вствительно й к мутаци ям. Му- та ции митохо ндриальной Д НК обнаруже ны в различ ных злокачест венных опу холях [1]. Эт и мутации з атрагивают к ак регионы, ко ди- рующие бе лки, так и « некодирующ ие» област и ДНК. Мут ации 13 ге нов, кодиру ющие белки м итохондриа льной цепи пере носа электро нов, могут в ызывать из менения в а ктивности к ле- точного д ыхания, и, т аким образо м, влиять н а метаболиз м раковых к леток. Част ичное инги- б ирование о кислительно го фосфори лирования вс ледствие мут аций митохо ндриальной Д НК повышает обр азование а ктивных фор м кис- лоро да (АФК). Н акопление АФ К может об- ус лавливать по явление мут аций протоо нкоге- нов и з апускать про цесс репли кации, при водя в ито ге к развит ию опухоли [ 2]. Исследо вания с за меной мито хондриально й ДНК в опу холе- вых к летках на мут антную фор му обуслов ило ингибиро вание окис лительного фосфор илиро- ван ия, повыше ние образо вания АФК, ус иление рост а и метаст атического поте нциала эти х кле- ток [ 3,4]. С дру гой сторон ы, недавни ми ис- сле дованиями м итохондриа льной ДНК, вз ятой из 1675 б иопсийных обр азцов трид цати раз- л ичных видо в злокачест венных опу холей, не у далось найт и доказате льств того, что н айден- ные мут ации митохо ндриальной Д НК способ- ст вуют развит ию и распростр анению рако вых клеток [5].
Потенциальным пр изнаком нару шения функ ций митохо ндрий с пос ледующим р аз- витием фе номена Варбур га также мо жет быть я вление разоб щения окис лительного фосфо- р илирования и т каневого д ыхания, об нару- женное в ле йкозных клет ках [6]. По вышение экс прессии мито хондриально го белка UС Р2 (unсоuр ling рrоtе in 2), участ вующего в это м процессе р азобщения, б ыло обнару жено при р аке молочно й железы, я ичников, моче вого пузыр я, пищевод а, яичек, поче к, легких, то л- стого к ишечника и пре дстательно й железы. Кро ме того, по казано, что э кспрессия бе лков UСР2 в о пухолевых к летках молоч ной железы л инии MСF7 ве дет к сниже нию митохо ндри- ально го мембран ного потен циала и по выше- нию мет астатическо го потенци ала этих к леток [7].
Гипотеза В арбурга: ар гументы
И это В 197 9 году Rеit zеr и соавтор ы показали, что к летки карц иномы шейк и матки ис поль- зуют д ля образов ания АТФ пре дпочтитель но окислите льное фосфор илирование [8]. Т ак- же обн аружены не которые ли нии глиомн ых клеток, с ильно завис ящие от ок ислительно го фосфори лирования, а не которые гл иомные клет ки, которые д ля получен ия энергии пре д- почтите льно испол ьзуют глико лиз («глико- л итические г лиомы»), с пособны пере клю- чатьс я на окисл ительное фосфор илирование в ус ловиях деф ицита глюкоз ы [9]. Подоб ное явление х арактерно и д ля опухоле вых клеток ше йки матки, ле гких, пече ни и подже лудочной же лезы [10-1 2]. Такая п ластичност ь указывает н а тесное вз аимодейств ие между г ликолизом и о кислительн ым фосфори лированием с це лью адаптации ме ханизмов обр азования э нергии к из менениям м икроокруже ния. Иссле дованиями Р. Hе rst и M. Bе rridgе обн аружен ряд л иний опухо левых клето к (HL60, Hе Lа, 143B, U 937), испо льзующих в к ачестве ос новного источ ника энерг ии митохон дриальное д ыхание [13]. Из мерение в к летках HеL а вклада о кислительно го фосфори лирования в обр а- зование АТФ по казало, что в м итохондрия х этих клето к образуетс я 79% АТФ и то лько при г ипоксии этот в клад снижаетс я до 30% [14]. В ретрос пективном обзоре о дин из авторо в этих исс ледований Р. Море но-Санчез от метил, что, хот я гликолиз и грает важну ю роль в э нергети- чес ком обмене о пухоли, зн ачительное ко ли- чество з локачестве нных опухо лей в качест ве источни ка энергии ис пользуют о кислитель- ное фосфор илирование и ли окислите льное фосфор илирование в сочет ании с гли колизом [15]. Нес мотря на от мечаемое в р яде исследо- в аний сниже ние числа и р азмера мито хондрий [16-18], о пухолевые к летки сохр аняют способ- ност ь к быстро му переключе нию энергет иче- ского об мена от гл иколиза к о кислительно му фосфори лированию в тече ние канцеро генеза. Это пере ключение т акже наблю дается и н а уровне о кисления г лутамина, которое мо жет протек ать двумя с пособами: « аноксическ им» с образо ванием лакт ата или ок ислением, со пря- женны м с окислите льным фосфор илировани- е м [19].
Взаимосвязь мет аболизма г люкозы и г лутамина в р аковых клет ках В рако вых клетка х метаболиз м глюкозы и г лутамина с вязаны дру г с другом и а ктивно коор динируются [ 20]. Урове нь глутами на в клетк ах может в лиять на х арактер за хвата глюкоз ы. Так, по вышение в к летке уров ня глутами на, в конеч ном итоге, и ндуцирует ус иление зах вата глюкоз ы. В культуре о пухолевых к леток с деф ицитом глю козы в пит ательной сре де резко по вышается а ктивность фер мента глут аматдегидро геназы, котор ый катализ ирует превр ащение глут амата в ал ьфа-кетоглут арат, испо льзуемый в ре акциях ЦТК. Это с пособствует в ыживанию о пухолевых к леток даже пр и резко за медленном г ликолизе. Н апротив, тор можение мет аболизма г лутамина в о пухолевых к летках пос ле экспери ментального « выключения» г лутаминазы ко мпенсируетс я активацие й в них пиру ваткарбокс илазы, котор ая использует п ируват, обр азующийся в хо де гликолиз а, для попо лнения ЦТК о ксалоацетато м. Недавно уст ановлен еще о дин механиз м выживани я, по край ней мере, не которых ли ний опухоле вых клеток в ус ловиях рез кого недост атка глюкоз ы. Таким ме ханизмом я вляется мет аболически й путь обр азования фосфое нолпируват а из глута мина через по вышение акт ивности мито хондриально й изоформы фосфое нолпируват карбоксики назы. Далее фосфое нолпируват ис пользуется д ля метабол ических путе й биосинтез а, в норме по ддерживаем ых метабол измом глюкоз ы, таких к ак синтез сер ина и пури нов [21]. Необ ходимо отмет ить, что фу нкция мито хондриально й изоформы фосфое нолпируват карбоксики назы долгое вре мя была не известной. То лько в пос леднее вре мя показано, что этот фер мент являетс я элементо м программ ы выживани я опухолев ых клеток в стрессо вых услови ях при деф иците глюкоз ы, недостат ке глутами на или стрессе э ндоплазмат ического рет икулума [2 2]. Таким обр азом, сущест вование ме ханизмов мет аболическо й адаптаци и опухолев ых клеток к не достатку г лавных ее нутр иентов пре дполагает, что о дно лишь и нгибирован ие гликолиз а или ингиб ирование то лько метабо лизма глут амина вряд л и могут быт ь достаточ но эффекти вными страте гиями в прот ивоопухоле вой терапи и. Очевидно, что по лученные в н астоящее вре мя научные д анные толь ко подтвер ждают точку зре ния Отто В арбурга, в ысказанную и м еще в 19 30-м году в пре дисловии к а нглийскому из данию книг и «Биохими я опухолей» о то м, что «чтоб ы убить опу холевую клет ку в живом ор ганизме путе м лишения ее э нергии, необ ходимо, ка к и в экспер иментах in v itrо, ингиб ировать ка к брожение, т ак и клеточ ное дыхание».
Заключение
- Хотя во прос о том, что же все-т аки первич но: метабо лические л и изменени я, которые з апускают к анцерогенез, и ли опухоле вая трансфор мация клет ки, котора я вызывает мет аболические из менения, – по ка еще не ре шен, многие исс ледования по казывают, что по вышенная з ависимость от г ликолиза х арактерна д ля большинст ва злокачест венных опу холей и что г ликолиз обес печивает о пухолевые к летки моле кулами АТФ и мет аболически ми интерме диатами дл я их роста и про лиферации.
- Ест ь два разн ых сценари я, посредст вом которы х митохондр ии могут уч аствовать в к анцерогенезе: а) д исфункция м итохондрий – это пер вичная прич ина развит ия опухоли и аэроб ного глико лиза, б) д исфункция м итохондрий – это все го лишь второ й этап в мет аболическо й перестро йке опухоле вой клетки, то ест ь следствие о пухолевой тр ансформаци и клетки. Оче видно, что и меются при меры линий о пухолевых к леток, у котор ых обнаруже но снижение фу нкции мито хондрий, в ызванное мут ациями мито хондриально й ДНК или я дерной ДНК, ко дирующей не которые мито хондриальн ые белки. Н апротив, в дру гих линиях о пухолевых к леток низк ий уровень о кислительно го фосфори лирования мо жет быть с ледствием ус иления гли колиза, пр ичиной чего я вляются ги поксия или ге нетические из менения он когенов и ге нов-онкосу прессоров. К лассическа я дилемма « курицы и я йца» данно й проблемы, к со жалению, по ка не разре шена, но н аличие тес ной связи ме жду онкоге нами и эффе ктом Варбур га уже не в ызывает со мнений.