Актуальность
По данным группы онкологической статистики Российского онкологического научного центра РАМН им. Н.Н. Блохина, в 2007 году скончалось от рака – 288,6 тыс. человек, в день это заболевание уносит около 780 россиян. Мужчины гибнут в основном от рака легкого, желудка и предстательной железы. А женщины – от рака молочной железы, желудка, ободочной и прямой кишки и яичников. С 1997 по 2007 год прирост числа заболевших онкологическими заболеваниями составил 13%. Злокачественные заболевания кожи составляют около четверти от всех злокачественных опухолей. Меланома в структуре онкологической заболеваемости составляет только 3%. Ежегодно 7 человек из 100 тысяч заболевают меланомой. Меланома является серьезной проблемой из-за своей высочайшей способности к метастазированию. Кожный покров легко доступен для осмотра, несмотря на это, запущенные формы злокачественных новообразований кожи не редкость. Эти факты свидетельствуют об актуальности изучения причин и механизмов развития онкозаболеваний [1-5]. В последнее время появилось множество работ, на основе PCR свидетельствующих о вовлечении в онкопроцесс различных структур организма под воздействием ПВЧ (НPV) инфекции: рак шейки матки, колоноректальный рак, раки носоглотки, и даже рак молочной железы [17]. По данным Всемирной Организации Здравоохранения ежегодно в мире вирусы папилломы человека вызывают до 500 000 новых случаев рака шейки матки и ежегодно около 240 000 женщин умирают от цервикального рака. Приблизительно 20 миллионов людей в США к настоящему времени заражены НPV [12]. По крайней мере, 50 процентов сексуально активных мужчин и женщин приобретают инфекцию НPV один раз в жизни. К 50-летнему возрасту прогнозируется приобретение НPV инфекции у 80 процентов людей репродуктивного возраста [16]. Около 6 миллионов ежегодно инфицируются новой НPV инфекцией. При этом в США отмечаются 2,8 миллионов случаев с анормальным ПАП тестом, более 10 000 случаев цервикального рака, вызванного ВПЧ (НPV) и около 4000 случаев смерти женщин от рака шейки матки. Несмотря на огромное количество работ, посвящённых изучению папилломовирусной инфекции (НPI), разработку профилактики заражения папилломавирусом человека (НPV) и носительства у людей различных возрастных групп, получение исчерпывающих данных о 100 видах вируса НPV, определение степени их злокачественности, вопрос о ранней диагностике онкогенеза в структурах организма человека, повреждаемых НPV, до сих пор не решён окончательно[10, 15]. Открытие эндогенных вирусов, ознаменовавшее новый этап в развитии вирусогенетической теории возникновения рака, сформулированной Л. А. Зильбером (1968), потребовало по-новому пересмотреть не только всю проблему онкогенеза в целом, но и само происхождение онкорнавирусов [1]. Появившиеся в последние годы более общие концепции и гипотезы (например, гипотеза вирогена Huebner и Todaro или протовируса Temin) уже включают в себя все положения и постулаты вирусогенетической теории как неотъемлемую часть [7, 13]. Тем не менее, 98% спонтанно выздоравливающих пациентов без лечения при НPV – инфекции свидетельствуют о некоторой спекулятивности в необходимости вакцинации для профилактики онкогенеза, а также об отсутствии исчерпывающих доказательных данных о том, что определённые штаммы, чаще встречающиеся на фоне онкологии шейки матки, более патогенны, чем другие. Несмотря на многочисленные полученные сведения о биологии вируса, путях заражения, патогенезе, клинических проявлениях инфекции, поражённости HPV – инфекцией школьников, природа и механизмы развития разрастаний структур кожи, подвергшихся контаминации вируса, до сих пор не известны, а также не доказано, что именно папилломавирусы вырабатывают пусковые для канцерогенеза вещества [8, 11, 14]. Обсуждается роль иммуноцитов при ПВЧ (НPV) инфекции различных структур организма человека [16]. На современном этапе рассматриваются различные клинические формы заболевания: манифестные – остроконечные кондиломы (аногенитальные бородавки), субклинические (интраэпителиальная неоплазия) и латентные, обсуждаются подходы к лечению ПВИ (PVI), включающие деструктивные (физические, химические), хирургические, иммунологические и комбинированные методы[5]. Тем не менее, до сих пор не решён вопрос, от чего зависит глубина контаминации в эпителиальные пласты вируса, каков механизм канцерогенеза при HPV, вырабатываются ли индукторные онкогенные вещества папилломавирусами [6]. Также на современном этапе не установлены точные механизмы повреждения НPV кожи и слизистых оболочек человека. Учитывая высокую инфицированность населения HPV, актуальность изучения локального иммунного гомеостаза кожи и слизистых оболочек желудочно-кишечного тракта при вирусной контаминации, является чрезвычайно высокой [9].
Целью нашего исследования является анализ общих закономерностей и морфологических особенностей папиллом желудка и кожи человека.
Материалы и методы
В работе использован материал 14 биоптатов кожи и 25 биоптатов слизистой оболочки желудка пациентов в возрасте от 10 до 78 лет. По клиническим показаниям и с согласия пациентов производили забор материала бородавок и разрастаний кожи предполагаемой папиломавирусной этиологии. Дополнительно проводили PCR – реакцию для доказательства наличия папилломавируса и на выявление штамма. Иммуногистохимическими методами на определение фенотипов иммуноцитов в биоптатах кожи, сохраненных в растворе Митчела, с помощью экспрессии GDI-антигена – гликопротеина, являющегося высокоспецифичным маркером для клеток Лангерганса (Dendriticcells, DC, клетки Ральфа Штeйнмана, 1973) и их пролиферирующих форм, произвели фенотипировани еиммуноцитов и проанализировали их количественные соотношения, а также выявили особенности топографии иммуноцитов при НPV. Для установления особенностей распределения CD4/CD8 при HPV изучили состав и топографию иммуноцитов в нормальной коже человекаи слизистых оболочек в период ремиссии, а также провели сравнительный анализ в различных возрастных группах. Интерпретация результатов проведена с помощью микроскопа OlympusBX51, иллюстрации получены с помощью цифровой камеры РDx25, статистическая обработка материала произведена с помощью фирменных компьютерных программ фирмы Olympus.
Результаты и их обсуждение
Установлено, что в эпидермисе нормальной кожи и эпителиальных пластинках слизистых оболочек желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) содержатся антиген презентирующие клетки (АПК) фенотипа CD68. При формировании полипов и папиллом, из которых выделены HPV, независимо от природы штамма, антигенпрезентирующие клетки в ряде случаев, особенно при длительной контаминации в анамнезе заболевания пациента, не идентифицируются среди покровных эпителиоцитов, а выявляются в собственной пластинке слизистой оболочки ЖКТ. В полипах желудочно-кишечного тракта обычным явлением служит идентификация эозинофильных гранулоцитов, что не наблюдается в папилломатозных разрастаниях кожи. При этом эозинофилы имеют форму ядра, отличающуюся от имеющейся у эозинофилов в периферической крови. Эти ядра имеют или шаровидную форму, или состоят из двух шаровидных фрагментов, соединённых утолщённой перемычкой. Также обращает внимание факт гибели, в первую очередь, клеток эпидермиса, вступивших в дифференцировку, а в слизистой оболочке – собственной пластинки слизистой оболочки на фоне пролиферирующих эпителиоцитов.
Имеющиеся данные о наличии ферментов группы гидролаз у макрофагов, составляющих инфильтрат, можно предположить, что эозинофилы и макрофаги участвуют в деструкции и ремоделировании ткани, подвергшейся микробной контаминации.
Работа выполнена при поддержке научного фонда ДВФУ, в рамках государственного задания 2014/36 от 03.02.2014 г. и Международного гранта ДВФУ (соглашение № 13-09-0602-м от 6 ноября 2013 г.).