Введение. Полиморфные варианты генов MTHFR 677С/Т, MTHFR 1298А/С, MTR 2756А/G и MTRR 66A/G, влияют на широкий спектр биохимических реакций в ходе фолатного цикла и, по мнению некоторых авторов, могут рассматриваться как фактор риска развития ряда заболеваний [1]. По данным литературы в последнее десятилетие отмечен рост числа инсультов в молодом возрасте на 40 % [2]. Полиморфизм генов, кодирующих ферменты фолатного цикла, могут приводить к снижению их активности во время обмена фолатов и вызывать нарушение фолатного цикла [3]. Фенотипическим маркером носительства полиморфных генов ферментов фолатного цикла является гипергомоцистеинемия [4].

Цель исследования. Определение влияния полиморфизма генов ферментов фолатного цикла на изменения биохимических показателей больных с острыми нарушениями мозгового кровообращения.

Материал и методы. Материалом исследования служила сыворотка крови 134 человек, среди которых 53 женщины и 81 мужчина с диагнозом острое нарушение мозгового кровообращения, находящихся на стационарном лечении в НИИ – Краевая клиническая больница №1 им. профессора С. В. Очаповского города Краснодара с 2020 по 2024 год. Больные были разделены на 4 группы по половому и возрастному признаку: в первую (1) группу вошли женщины в возрасте от 18 до 44 лет, во вторую (2) группу вошли женщины в возрасте от 45 до 59 лет, в третью (3) группу вошли мужчины в возрасте от 18 до 44 лет и в четвертую (4) группу вошли мужчины в возрасте от 45 до 59 лет.

В данной работе идентификацию генетических вариантов полиморфизмов, ассоциированных с нарушениями фолатного цикла, проводили методом ПЦР в режиме "real time". Определение биохимических показателей осуществляли с помощью фотометрического ферментативного и иммунохемилюминесцентного методов на биохимическом анализаторе ARCHITECT с8000. Статистическая обработка полученных данных корреляции была произведена с помощью программы SAS: Data and Al solutions (США).

Результаты исследования и их обсуждение. В таблице 1 представлено процентное соотношение встречаемости гомозиготной нормальной, гетерозиготной и гомозиготной патологической аллелей генов MTHFR 677С/Т, MTHFR 1298А/С, MTR 2756А/G и MTRR 66A/G 4 групп больных, а также подсчитан χ2 для данных генов.

Таблица 1 – Встречаемость генов ферментов фолатного цикла

Результаты показали, что у больных четырех групп встречаемость полиморфизма каждого гена отличалась. Нормальный гомозиготный генотип MTHFR 677C/T встречался чаще у пациентов, чем гетерозигота и патологическая гомозигота у пациентов первой и третьей групп, результаты составили 44,44% и 50%, соответственно. У пациентов двух других групп гетерозиготное состояние встречалось чаще, чем нормальная гомозигота и составила 50% и 46,81%, соответственно.

Нормальная гомозигота у пациентов с полиморфизмом MTHFR 1298A/C встречалась чаще, чем гетерозигота и патологическая гомозигота у пациентов второй, третьей и четвертой групп и составила 45,83%, 50% и 63,83%, соответственно. У пациентов первой группы гомозиготное нормальное и гетерозиготное формы встречались почти в одинаковом процентном соотношении, но форма гетерозиготы была отмечена чаще в 3,7%. Также можно заметить, что у пациентов четвертой группы определение χ2 составило 9,1. Это говорит о значительном отклонении наблюдаемых данных от ожидаемых.

У больных с полиморфизмом 66A/G гена MTRR гетерозиготная форма встречалась чаще у всех четырех групп, чем нормальная гомозигота и результаты показали 48,15%, 58,33%, 47,06% и 53,19%, соответственно. Следует заметить, что патологическая гомозигота встречалась чаще, чем нормальная гомозигота у пациентов четырех групп в сравнении с другими полиморфизмами генов и составила 25,93%, 25%, 35,29% и 25,53%, соответственно.

У больных с полиморфизмом 2756A/G гена MTR нормальная гомозигота встречалась чаще у пациентов второй и четвертой групп, чем гетерозигота и патологическая гомозигота, результаты составили 79,17% и 61,7%, соответственно. Среди пациентов первой и третьей групп преобладали гетерозиготы, что составило 48,65% и 55,88%, соответственно.

В таблице 2 представлены полученные концентрации биохимических показателей сыворотки крови больных с острыми нарушениями мозгового кровообращения в оценке нарушения липидного обмена.

Таблица 2 – Биохимические показатели

Имеется некоторое повышение концентрации ЛПВП в сыворотке крови женщин пациентов первой группы (1,34±0,53 ммоль/л) в возрасте от 18 до 44 лет и второй группы (1,21±0,36 ммоль/л) в возрасте от 45 лет и старше (p≤0,01), что отмечается значимостью различий. Это может быть вероятно связано с тем, что с возрастом у женщин происходило изменение гормонального цикла, нарушение обмена веществ. Колебания уровня половых стероидных гормонов во время менструального цикла могут влиять на уровень сывороточных липопротеинов и их компонентов, в частности ЛПВП [5].

Повышенный уровень гомоцистеина в сыворотке крови отмечен в четвертой группе (15,9±4,68 ммоль/л), в которую входили мужчины от 45 лет и старше и в третьей группе (12,86±4,74 ммоль/л), в которую входили мужчины в возрасте от 18 до 44 лет (p≤0,01).

Из данных таблицы 2 можно отметить, что концентрация гомоцистеина в сравнении с референсными значениями от 5 до 12 ммоль/л в сыворотке крови двух групп находилась в референтных пределах, но в сыворотке крови четвертой группы замечено повышение концентрации гомоцистеина до 15,9 ммоль/л, что указывает на возможный риск развития атеросклеротических бляшек и тромбоза: высокий уровень гомоцистеина может повреждать стенки сосудов, делая их поверхность рыхлой, тем самым усиливая риск тромбообразования; токсическое действие гомоцистеина на эндотелий сосудов может приводить к выраженным нарушениям его вазомоторной функции [6].

Изменения концентрации общего холестерина с референсными значениями 2,5–5,14 ммоль/л были отмечены в сыворотке крови пациентов второй группы и составили 5,32 ммоль/л, в сыворотке больных других групп показатель находился в пределах референтных значений. Изменения концентрации ЛПВП и ЛПНП выше референтных значений не было отмечено в сыворотке крови больных. Изменения концентрации триглицеридов (референсные значения <1.69 ммоль/л) были отмечены в крови больных четвертой группы и составили 1,88 ммоль/л, в сыворотке крови больных остальных групп находился в пределах референтных значений.

Для определения связи между биохимическими показателями и генами ферментов фолатного цикла была отмечена корреляционная связь. Данные позволяют нам прогнозировать возможность развития заболеваний, тем самым регулировать и контролировать образ жизни для снижения вероятности их развития. Полученные результаты представлены в таблице 3.

Таблица 3 – Корреляционная связь биохимических показателей и генов ферментов фолатного цикла

Сильная положительная корреляция была отмечена между геном MTHFR 677С/Т и концентрацией общего холестерина (r=0,9); между геном MTHFR 1298А/С и концентрацией триглицеридов существовала сильная корреляция (r=0,8); между MTRR 66A/G и концентрацией общего холестерина – r=0,9; между геном MTR 2756А/G и концентрацией общего холестерина отмечена сильная отрицательная корреляция равная r=-0,8.

Умеренная положительная корреляция была отмечена между геном MTHFR 677С/Т и концентрацией холестерина высокой плотности (r=0,56); между геном MTHFR 1298А/С и концентрацией холестерина низкой плотности (r=0,6); между геном MTRR 66A/G и концентрацией холестерина низкой плотности (r=0,6).

Умеренная положительная корреляция была отмечена между концентрацией гомоцистеина и геном MTHFR 1298А/С (r=0,6). Однако была отмечена слабая корреляция между концентрацией гомоцистеина и генами MTHFR 677С/Т, MTRR 66A/G и MTR 2756A/G. Это значит, что наличие патологических форм аллелей генов ферментов фолатного цикла не обязательно сопровождается увеличением уровня гомоцистеина.

Выводы. Таким образом, в исследовании отмечается, что гены ферментов фолатного цикла могут оказывать влияние на процессы липидного обмена, что отражается в изменении концентраций биохимических показателей. Наибольшая зависимость отмечена между MTHFR 677C/T, MTRR 66A/G, MTR 2756A/G и концентрацией общего холестерина; уровни концентрации гомоцистеина и триглицеридов могут иметь связь с MTHFR 1298A/C; концентрация ЛПВП может иметь связь с MTHFR 677C/T; концентрация ЛПНП может иметь связь MTHFR 1298A/C и MTRR 66A/G.